Соглашение № 14.576.21.0011
о предоставлении субсидии в рамках мероприятия 1.2 ФЦП «Исследования и разработки по приоритетным направлениям развития научно-технологического комплекса России на 2014 - 2020 годы»
№ госрегистрации 114082840015

Программа «Исследования и разработки по приоритетным направлениям развития научно-технологического комплекса России на 2014-2020 годы».

Соглашение о предоставлении субсидии - 14.576.21.0011

Тема: «Сенсорные системы на основе lux-оперонов для детекции различных групп токсических и биологически активных веществ»

Уникальный идентификатор прикладных научных исследований (проекта) RFMEF157614X0081.

Индустриальный партнер - Общество с ограниченной ответственностью Научно-технический Центр «Экон»

Цель проекта - Разрабoтка высoкoчувствительных, специфических тест-систем (lux-биoсенсoры), спoсoбных фиксирoвать стрессoвые реакции (SOS-oтвет, «теплoвoй шoк», oкислительный стресс), индуцируемые в клетке тoксическими агентами и биoлoгически активными веществами, иoны металлoв и металлoидoв, антибиoтики, аутoиндуктoры. Разрабoтка прoектoв метoдик испoльзoвания тест-систем (групп lux-биoсенсoрoв) для oпределения прирoды тoксичнoсти веществ.

Основные результаты проекта за 2 этап

Проведено конструирование lux-биосенсоров P-ZntA, P-MphA, P-NisA, P-LsrA, P-RecA, P-SOSdin, P-AlkA, P-GrpE, P-RpoE, P-FabA, P-OxyS, P-IscRUSA

Проведена калибровка lux-биосенсоров: P-ZntA, P-MphA, P-NisA, P-LsrA, P-RecA, P-SOSdin, P-AlkA, P-GrpE, P-RpoE, P-FabA, P-OxyS, P-IscRUSA со стандартными токсическими и биологически активными веществами.

Определены основные параметры индуцируемых lux-биосенсоров: P-ZntA, P-MphA, P-NisA, P-LsrA, P-RecA, P-SOSdin, P-AlkA, P-GrpE, P-RpoE, P-FabA, P-OxyS, P-IscRUSA

Проведено депонирование биосенсорных штаммов: P-ZntA, P-MphA, P-NisA, P-LsrA, P-RecA, P-SOSdin, P-AlkA, P-GrpE, P-RpoE, P-FabA, P-OxyS, P-IscRUSA в ВКПМ.

Проведена наработка биосенсорных штаммов P-MerR, P-CopA, P-ArsR, P-ZntA, P-TetR, P-AmpC, P-ColD, P-MphA, P-NisA, P-LuxR, P-LsrA, P-RecA, P-SOSdin, P-AlkA, P-GrpE, P-RpoE, P-IbpA : P-FabA P-KatG, P-SoxS, P-OxyS, P-IscRUSA, P-Leo1, P-Xen7.

Разработаны паспорта на тест-системы в т.ч.:

• Паспорт на тест-систему для детекции токсических агентов, индуцирующих в клетках окислительный стресс
• Паспорт на тест-систему для детекции токсических агентов, повреждающих ДНК клетки
• Паспорт на тест-систему для детекции токсических агентов, повреждающих белки в клетке
• Паспорт на тест-систему для детекции токсических агентов, повреждающих мембраны клетки
• Паспорт на тест-систему для детекции антибиотиков
• Паспорт на тест-систему для детекции ионов металлов и металлоидов
• Паспорт на тест-систему для детекции аутоиндукторов 1-го и 2-го типов.
• Паспорт на тест-систему для определения интегральной токсичности.

Основные результаты проекта

Проведено конструирование специфических lux-биосенсоров: P-MerR, P-CopA, P-ArsR, P-ZntA предназначенных для определения в среде ионов ртути, кадмия, меди, серебра, цинка, свинца, мышьяка, сурьмы; P-TetR, P-AmpC, P-IbpA, P-ColD, PMphA, P-NisA предназначенных для обнаружения в среде антибиотиков тетрациклинового ряда, бета-лактамного ряда, аминогликозидов, фторквинолонов, макролидов, низина; P-LuxR, P-LsrA предназначенных для обнаружения в среде аутоиндукторов, определяющих коммуникацию бактериальных клеток в популяции; P-ColD, P-RecA, P-SOSdin, P-AlkA

предназначенных для детекции спектра токсических веществ, вызывающих повреждения ДНК клетки (генотоксическое действие); P-GrpE, P-IbpA, P-RpoE предназначенных для детекции спектра токсических веществ, вызывающих повреждения белков в клетке; P-FabA предназначенного для детекции спектра токсических веществ, повреждающих мембраны клетки; P-KatG, P-SoxS, POxyS,

P-IscRUSA предназначенных для детекции спектра токсических веществ, индуцирующих формирование в клетке активных форм кислорода (перекись водорода, супероксид анион); P-Xen7, P-Leo1 предназначенных для определения интегральной токсичности.

Определены основные параметры сконструированных биосенсоров, проведена их калибровка со стандартными токсическими и биологически активными веществами.

Разработаны паспорта сконструированных биосенсорных штаммов. Проведено депонирование указанных штаммов в ВКПМ (Всероссийская коллекция промышленных микроорганизмов).

Проведена разработка высокочувствительных, специфических тест-систем (lux-биосенсоры), способных фиксировать стрессовые реакции (SOS-ответ, «тепловой шок», окислительный стресс), индуцируемые в клетке токсическими агентами и биологически активными веществами, ионы металлов и металлоидов, антибиотики, аутоиндукторы. Разработаны паспорта на указанные тест-системы. Проведена разработка проектов методик использования тест-систем( групп lux-биосенсоров) для определения природы токсичности веществ.