Высокоэффективная продукция биологически активного секретируемого гранулоцитарно-макрофагального колониестимулирующего фактора человека рекомбинантным вирусом осповакцины

Автор: А.А. Гражданцева, Г.Ф. Сиволобова, А.В. Ткачева, И.П. Гилева, Е.В. Кулигина, В.А. Рихтер, Г.В. Кочнева

Страница: 13-21

Высокоэффективная продукция биологически активного секретируемого гранулоцитарно-макрофагального колониестимулирующего фактора человека рекомбинантным вирусом осповакцины

Биотехнология, 2015, № 5, С. 13-21

УДК 577.21:578.28: 615.371

Раздел:  «Продуценты, биология, селекция, генетическая инженерия»

А.А. Гражданцева ^{1, 2},  Г.Ф. Сиволобова ^{1, 2},  А.В. Ткачева ^{1, 2},  И.П. Гилева ¹,  Е.В. Кулигина ²,  В.А. Рихтер ²,  Г.В. Кочнева ^{1, 2, *}

¹  ФБУН «Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии «Вектор»»,  Новосибирская область, Кольцово, 630559

²  Институт химической биологии и фундаментальной медицины СО РАН,  Новосибирск, 630090

e-mail:  g.v.kochneva@yandex.ru

Получен штамм рекомбинантного вируса осповакцины VV-GMCSF-S1/3, содержащий встройку полноразмерной копии ДНК матричной РНК гранулоцитарно-макрофагального колониестимулирующего фактора (ГМ-КСФ) человека в структурной части гена вирусной тимидинкиназы. Экспрессия гена ГМ-КСФ в составе рекомбинантного вируса осуществляется под контролем природного промотора р7.5K вируса осповакцины с образованием секретируемой зрелой формы белка с молекулярной массой 32 кДа. Биологическую активность ГМ-КСФ оценивали по стимуляции пролиферации цитокин-зависимых клеток эритролейкоза человека TF-1. Уровень секреции биологически активного ГМ-КСФ человека в системе рекомбинантный вирус осповакцины — клетки млекопитающих составил 1—40 мкг/мл культуральной среды. Рекомбинантный штамм VV-GMCSF-S1/3 может быть использован в качестве продуцента зрелой гликозилированной формы ГМ-КСФ человека, а также в качестве вектора для конструирования онколитических вирусов и поливалентных вакцинных препаратов.

Ключевые слова:  ГМ-КСФ человека,  клетки эритролейкоза человека TF-1,  оценка стимуляции пролиферации клеток ХТТ,  рекомбинантный вирус осповакцины,  штамм Л-ИВП.

Полная версия данной статьи находится на сайте Российской научной электронной библиотеки по адресу:  http://elibrary.ru/item.asp?id=25460585

23.05.2016, 4335 просмотров.