Получение моноПЭГилированного интерферона бета-1а человека: оптимизация условий N-концевого ПЭГилирования

Автор: Д.В. Коржавин, Т.В. Черновская, Ю.Г. Ефанов, Е.Г. Руденко, Р.А. Иванов, А.Б. Пшеничникова, В.И. Швец

Страница: 49-60

Получение моноПЭГилированного интерферона бета-1а человека: оптимизация условий N-концевого ПЭГилирования

Биотехнология, 2015, № 1, С. 49-60

УДК 577.112.4

Раздел:  «Технология биопрепаратов»

Д.В. Коржавин ^{1, 2, *},  Т.В. Черновская ¹,  Ю.Г. Ефанов ¹,  Е.Г. Руденко ¹,  Р.А. Иванов ¹,  А.Б. Пшеничникова ²,  В.И. Швец ²

¹  Биофармацевтическая компания ЗАО «БИОКАД»,  Санкт-Петербург, 198515

²  Московский государственный университет тонких химических технологий им. М.В. Ломоносова,  Москва, 119571

e-mail:  korjavin@biocad.ru

В работе проведена модификация рекомбинантного интерферона (ИФН) бета-1а человека полиэтиленгликолем (ПЭГ). Реакцию проводили с использованием линейного активированного бутиральдегидного производного ПЭГ с молекулярной массой 30 кДа. В результате проведения многофакторного эксперимента выявлена зависимость выхода моноПЭГилированного белка от условий и определены оптимальные условия реакции. Разработана схема одностадийной хроматографической очистки, позволяющая получить коньюгат ПЭГ-ИФН бета-1а чистотой более 98%. Результаты масс-спектрометрических исследований показали, что очищенный коньюгат имеет молекулярную массу 54130 Да и является ПЭГилированным ИФН бета-1а, в котором N-концевой метионин связан с одной молекулой ПЭГ. Полученный ПЭГ-ИФН бета-1а обладает противовирусной активностью и может рассматриваться как перспективный кандидат при создании препарата пролонгированного действия для лечения рассеянного склероза.

Ключевые слова:  ИФН-бета человека,  модификация,  полиэтиленгликоль,  пролонгированная лекарственная форма,  рассеянный склероз.

Полная версия данной статьи находится на сайте Российской научной электронной библиотеки по адресу:  http://elibrary.ru/item.asp?id=23241250

26.10.2015, 4335 просмотров.