Activities of Elements of the Yeast α-Factor Precursor Leader at Different Stages of Somatropin Secretion by Saccharomyces cerevisiae

Автор: K.Yu. Kazachenko, B.D. Efremov, and D.G. Kozlov

Страница: 25-31

Activities of Elements of the Yeast α-Factor Precursor Leader at Different Stages of Somatropin Secretion by Saccharomyces cerevisiae

Биотехнология, 2014, № 1, С. 25-31

UDK 582.282.23: 579.6

Раздел:  «Продуценты, биология, селекция, генетическая инженерия»

K.Yu. Kazachenko,  B.D. Efremov,  and  D.G. Kozlov ^*

The State Research Institute for Genetics and Selection of Industrial Microorganisms (GosNIIgenetika),  117545, Moscow Russia

e-mail:  dg_kozlov@genetika.ru

An analytical system for a quantitative assessment of contributions of pre- and pro-components of the yeast α-factor leader to key stages of somatropin secretion in Saccharomyces cerevisiae has been designed. Using this system, it was shown that: 1) the α-factor pro-peptide has contributed almost equally to the secretion at the Erv29p-dependent stage of vesicular transport and at the translocation stage; 2) of the two above stages, the Erv29p-dependent stage could only be optimized by using of two copies of the α-factor pro-peptide; 3) when the α-factor pre-peptide and the artificial pro-peptide with significantly greater hydrophobicity were compared it was found that somatropin secretion apparently depended on the translocation mode as higher secretion was achieved with hydrophobic artificial pre-peptide associated with the co-translational translocation.

Key words:  Erv29p,  pro-peptide,  signal peptide,  somatropin secretion,  translocation,  yeast α-factor leader peptide.

----------------------------------------------------------------------------------------------------------------

Активность элементов лидерной области предшественника α-фактора дрожжей на разных стадиях секреции соматропина у Saccharomyces cerevisiae

К.Ю. Казаченко, Б.Д. Ефремов, Д.Г. Козлов *

ФГУП «Государственный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроорганизмов» (ГосНИИгенетика),  Москва, 117545

e-mail:  dg_kozlov@genetika.ru

Сконструирована аналитическая система для количественной оценки вклада пре- и прокомпонентов лидерной области α-фактора дрожжей в ключевые стадии секреции соматропина у Saccharomyces cerevisiae. С использованием этой системы показано: 1) вклады пропептида α-фактора в Erv29p-зависимую стадию везикулярного транспорта и в стадию транслокации были примерно одинаковыми; 2) из двух упомянутых только Erv29p-зависимая стадия могла быть оптимизирована путем использования двух копий пропептида; 3) при сравнении пропептида α-фактора и значительно более гидрофобного искусственного пропептида было обнаружено, что секреция соматропина, по-видимому, зависела от способа транслокации, так как более высокий уровень секреции был достигнут с использованием гидрофобного искусственного пропептида, участвующего в ко-трансляционной транслокации.

Ключевые слова:  лидерный пептид α-фактора дрожжей,  пропептид,  сигнальный пептид,  секреция соматропина,  транслокация,  Erv29p.

19.05.2014, 3637 просмотров.