Разработка опытно-промышленной технологии производства живой культуральной вакцины против пандемического гриппа

Автор: Е.А. Нечаева, И.Ф. Радаева, Т.Ю. Сенькина, Н.Б. Герасименко, М.П. Богрянцева, Р.Н. Костылева, Н.В. Жилина, Т.М. Свириденко, К.Э. Зубарева, Н.А. Вараксин, Т.Г. Рябичева, И.В. Киселева, Н.В. Ларионова, Л.Г. Руденко

Страница: 23-34

Разработка опытно-промышленной технологии производства живой культуральной вакцины против пандемического гриппа

Биотехнология, 2013, № 6, С. 23-34

УДК 615.371:578.832.1.012

Раздел:  «Технология биопрепаратов»

Е.А. Нечаева ^{1, *},  И.Ф. Радаева ¹,  Т.Ю. Сенькина ¹,  Н.Б. Герасименко ¹,  М.П. Богрянцева ¹,  Р.Н. Костылева ¹,  Н.В. Жилина ¹,  Т.М. Свириденко ¹, К.Э. Зубарева ¹,  Н.А. Вараксин ¹,  Т.Г. Рябичева ¹,  И.В. Киселева ²,  Н.В. Ларионова ²,  Л.Г. Руденко ²

¹  ФБУН «Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии «Вектор»»,  п. Кольцово, Новосибирская область, 630559

²  ФГБУ «НИИ экспериментальной медицины» СЗО РАМН,  Санкт-Петербург, 197376

e-mail:  nechaeva@vector.nsc.ru

Разработана технология получения живой культуральной вакцины «Вектор-Флю» против пандемического гриппа на основе холодоадаптированного штамма вируса гриппа А/H1N1. В качестве клеточного субстрата использована культура клеток MDCK, аттестованная в соответствии с требованиями ВОЗ. Вакцина имеет вид аморфной массы, хорошо растворяется в дистиллированной воде (показатель рН составляет 6,90—6,94), является стерильной, не содержит микоплазмы и посторонние вирусы и обладает специфической активностью, равной (6,33—6,80) lg ЭИД₅₀/0,2 мл. При определении подлинности вакцины показано, что она взаимодействует с гомологичной типоспецифической сывороткой и не реагирует с гетерологичными сыворотками. Содержание остаточной клеточной ДНК в дозе вакцины составляет менее 10 нг. Изучение стабильности свойств вакцины в течение 1,5 лет хранения при температуре (4—8)° подтвердило, что ее специфическая активность сохранялась на исходном уровне. Серии вакцины прошли контроль в ФГБУ «НЦЭСМП» Минздрава России и были использованы для проведения доклинических испытаний, которые показали безвредность и иммуногенность препарата.

Ключевые слова:  вакцина «Вектор-Флю»,  культура клеток MDCK,  пандемический вирус гриппа A/H1N1.

----------------------------------------------------------------------------------------------------------------

Development of a Pilot Technology for Cell-Based Anti-Influenza Live Attenuated Pandemic Vaccine Manufacturing

E.A. Nechaeva ^{1, *},  I.F. Radaeva ¹,  T.Yu.Sen’kina ¹,  N.B. Gerasimenko ¹,  M.P. Bogryantseva ¹,  R.N. Kostyleva ¹,  N.V. Zhilina ¹,  T.M. Sviridenko ¹,  K.E. Zubareva ¹,  N.A. Varaksin ¹,  T.G. Ryabicheva ¹,  I.V. Kiseleva ²,  N.V.Larionova ²,  and  L.G. Rudenko ²

¹  The State Research Center of Virology and Biotechnology Vector,  630559, Kol'tsovo, Novosibirskaya oblast Russia

²  The Institute of Experimental Medicine, Russ. Acad. Med.Sci,  197376, St.-Petersburg Russia

e-mail:  nechaeva@vector.nsc.ru

A technology for the manufacturing of the Vector-Flu cell-based live attenuated pandemic vaccine using the A/H1N1 cold-adapted influenza strain has been developed. A certified line of MDCK cells was used as a substrate in accordance with the WHO guidelines. The final vaccine preparation was in the form of an amorphous mass and was easily water-soluble, pH value being 6.90 — 6.94; the potencies of monovalent bulks ranged from 6.33 to 6.80 log₁₀ EID₅₀/0.2 ml. Monovalent bulk release assays (sterility control, control for mycoplasma and extraneous agents, identity test with homologous type specific antiserum and lack of cross-reactivity with heterological antiosera) were successfully passed. The residual cellular DNA in the final vaccine formulation was less than 10 ng/dose. The vaccine preparation was substantially stable, namely, the specific potency losses were not found out at temperatures ranging from 4 to 8°C within a period of 1.5 year. The vaccine batches were controlled by the National Control Institute and subjected to preclinical trials that demonstrated the attenuation and immunogenicity of the preparation.

Key words:  A/H1N1 influenza pandemic virus,  MDCK cells,  Vector-Flu vaccine.

14.03.2014, 3585 просмотров.