Оптимизация профиля гликозилирования рекомбинантного интерферона-бета-1а при культивировании клеток СНО в биореакторе волнового типа

Автор: Н.В. Лобанова, А.А. Нурбаков, В.И. Аксенова, А.А. Чупыркина, Н.А. Шамонов, А.А. Клишин, Л.В. Ермолина, Е.Н. Сауткина, Р.А. Хамитов, Ю.А. Серегин.

Страница: 55-66

Оптимизация профиля гликозилирования рекомбинантного интерферона-бета-1а при культивировании клеток СНО в биореакторе волнового типа

Биотехнология, 2013, № 2, С. 55-66

УДК 602.6:612

Раздел:  «Технология биопрепаратов»

Н.В. Лобанова ^{1, *},  А.А. Нурбаков ¹,  В.И. Аксенова ¹,  А.А. Чупыркина ¹,  Н.А. Шамонов ¹,  А.А. Клишин ¹,  Л.В. Ермолина ²,  Е.Н. Сауткина ²,  Р.А. Хамитов ²,  Ю.А. Серегин ¹

¹  ООО «ФАРМАПАРК», Москва, 117246

²  ФГУП «Государственный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроорганизмов», Москва, 117545

e-mail :  natalya.lobanova@bioprocess.ru

В работе были подобраны условия культивирования продуцента рекомбинантного интерферона-бета-1а, созданного на основе клеток яичников китайского хомяка (СНО) при куматной системе экспрессии. Показано, что внесение в культуральную среду галактозы и уридина в конечной концентрации 10 и 2 мМ, соответственно, улучшает профиль гликозилирования целевого белка. Осуществлено масштабирование процесса для биореактора волнового типа с использованием одноразовых мешков, в результате которого сохранены динамика клеточного роста, удельная продуктивность и профиль гликозилирования интерферона-бета-1а, характерные для процесса, протекающего в малых объемах.

Ключевые слова:  биореактор, гликозилирование, интерферон-бета-1а, клетки СНО, культивирование, оптимизация.

---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

Optimization of Glycosylation Profile of Recombinant Interferon-Beta-1a Produced by СНО Cells in Wave-Induced Motion Bioreactor

N.V. Lobanova ^{1, *},  A.A. Nurbakov ¹,  V.I. Aksenova ¹,  A.A. Chupyrkina ¹,  N.A. Shamonov ¹,  A.A. Klishin ¹,  L.V. Ermolina ²,  E.N. Sautkina ²,  R.A. Khamitov ²,  and  Yu.A. Seryogin ¹

¹  Limited Liability Company “Pharmapark”, 117246, Moscow Russia

²  The State Research Institute for Genetics and Selection of Industrial Microorganisms, 117545, Moscow Russia

e-mail : natalya.lobanova@bioprocess.ru

Culturing conditions for a recombinant interferon-beta-1а producing cell line based on Chinese hamster ovary cells (CHO) and cumate expression system have been optimized. The addition of 10 mM galactose and 2 mM uridine to a media was shown to improve the glycosylation profile of the target protein. Scaling-up of the cultivation process to single-use wave-induced motion bioreactor allowed to maintain the cell growth rate, specific productivity and interferon-beta-1а glycosylation that are characteristic of the small-volume culturing.

Key words:  bioreactor, CHO cells, cultivation, interferon-beta-1a, glycosylation, optimization.

24.07.2013, 9301 просмотр .