Оптимизация процессов культивирования эукариотических клеток-продуцентов на основе линии СНО при производстве биофармацевтических препаратов

Автор: Н.В. ЛОБАНОВА1’*, А.А. НУРБАКОВ1, Е.Н. САУТКИНА2, Р.А. ХАМИТОВ2, Ю.А. СЕРЕГИН1

Страница: 8-25

Биотехнология, 2013, № 1, С. 8-25

Проблемы, перспективы

УДК 602.6:612

Н.В. ЛОБАНОВА1’*, А.А. НУРБАКОВ1, Е.Н. САУТКИНА2, Р.А. ХАМИТОВ2, Ю.А. СЕРЕГИН1

1 Общество с ограниченной ответственностью «Фармапарк», Москва, 117246

2 ФГУП "Государственный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроорганизмов", Москва, 117545

e-mail: natalya.lobanova@bioprocess.ru

Оптимизация процессов культивирования эукариотических клеток-продуцентов на основе линии СНО при производстве биофармацевтических препаратов

В обзоре рассмотрено использование клеток яичников китайского хомяка СНО как основной клеточной линии для получения рекомбинантных белков медицинского назначения; проведено сравнение различных типов и режимов культивирования. Особое внимание уделено описанию оптимизации условий культивирования, направленной на увеличение продуктивности и степени гликозилирования целевого белка. Рассмотрен подбор физико-химических параметров процесса (температуры, величины рН, уровня растворенного кислорода), а также состава питательной среды с внесением подпиток и добавок. Приведен сравнительный анализ биореакторов различного типа.

Ключевые слова: биореактор, биотехнология, гликозилирование, клетки СНО, культивирование, оптимизация, подпитка.

Получение рекомбинантных белков медицинского назначения является одной из перспективных, динамично развивающихся и прибыльных отраслей биотехнологии. Препараты на основе рекомбинантных белков успешно применяют для лечения таких тяжелых заболеваний, как рак, ревматоидный артрит, рассеянный склероз, анемии различной этиологии и т.д. [1]. Значительную часть производимых рекомбинантных препаратов представляют гликозилированные белки (цитоки-ны, гормоны, антитела, факторы коагуляции и др.); при этом получение полноценных высокоэф-

фективных препаратов возможно только в клетках млекопитающих [2—6]. Это связано с тем, что только эукариотические клетки обеспечивают широкий спектр необходимых посттрансляционных модификаций рекомбинантного белка, включая N-и O-гликозилирование, точное удаление лидерной последовательности в ходе секреции, а также правильный фолдинг белковой молекулы [7—11]. Кроме того, эукариотические клетки обладают способностью секретировать нативные белки в культуральную жидкость (КЖ), что облегчает процедуру их дальнейшей очистки [2, 7, 8].

Лобанова Наталия Валентиновна, Нурбаков Альфред Анасович, Сауткина Елена Николаевна, Хамитов Равиль Авгатович, Серегин Юрий Александрович.

Список сокращений: АК — аминокислоты; ДМСО — диметилсульфоксид; КЖ — культуральная жидкость; моноАТ — моноклональные антитела.

* Автор для переписки.

8

11.03.2013, 6921 просмотр .