Рекомбинантный Cry9A способен образовывать кристаллы в спорулирующих клетках Bacillus thuringiensis

Автор: Н.Е.Кириллова(1), Е.И.Левитин(1), Я.А.Войцеховская(1), Т.Г.Юдина(2), И.А.Залунин(1)*, Г.Г.Честухина(1)

¹ ФГУП ГосНИИ генетики и селекции промышленных микроорганизмов, Москва, 117545

² Московский государственный университет имени. М.В. Ломоносова, биологический факультет, Москва, 119991

В работе предложена система экспрессии, позволяющая получать в бациллярной клетке эффективную продукцию рекомбинантного белка Cry9A. Полученный белок идентичен природному с точки зрения иммунологических свойств, подверженности протеолизу и биологической активности. Показано, что рекомбинантный Cry9A образует кристаллические включения в спорулирующих клетках Bacillus thuringiensis. Таким образом, впервые получены свидетельства того, что Cry-белки, которые в природных штаммах формируют кристаллические включения совместно с другими эндотоксинами, способны образовывать кристаллы самостоятельно. Представленная система, включающая векторные репликативные носители, экспрессионные кассеты, а также протокол получения и культивирования штамма продуцента, позволяет легко манипулировать геном дельта эндотоксина Cry9A в ходе экспериментов по генно-инженерной модификации.

02.11.2010, 5154 просмотра.